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骨保護(hù)素試劑盒正確的操作流程應(yīng)該是這樣的!

2020-03-24 瀏覽次數(shù):2009

   骨保護(hù)素試劑盒預(yù)期用途:用于定量測定人血清或血漿中骨保護(hù)素的含量,骨保護(hù)素(OPG)或破骨細(xì)胞抑制因子(OCIF),是腫瘤壞死因子受體超家族11b(基因名TNFRSF11B)的一種糖蛋白。OPG由380個(gè)氨基酸合成,并在細(xì)胞內(nèi)組裝成同型二聚體,之后大部分以二硫鍵連接的同型二聚體分泌到細(xì)胞外間隙中。骨保護(hù)素由許多不同的組織和細(xì)胞類型(包括成骨細(xì)胞)產(chǎn)生的。 OPG作為RANKL的誘餌受體,是骨吸收的負(fù)調(diào)節(jié)因子,能抵消其促進(jìn)破骨細(xì)胞生產(chǎn)的功能。這種糖蛋白也參與血管鈣化的調(diào)控。
  骨保護(hù)素試劑盒用于科研請貯存于2-8℃,切勿冷凍,避免陽光直曬。未使用完的酶標(biāo)板條應(yīng)密封,2-8℃保存,具有方便、快速、靈敏等特點(diǎn),因其性質(zhì)穩(wěn)定、使用方便、價(jià)格低廉、在科研領(lǐng)域用途比較廣泛
  骨保護(hù)素試劑盒的操作流程:
  1. 骨保護(hù)素試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
  3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
  4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
  6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

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